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[生物化学]双脱氧末端终止法测序体系与PCR反应体系的主要区...

原题:
[生物化学]双脱氧末端终止法测序体系与PCR反应体系的主要区别是前者含有:?
选项:
A.模板
B.引物
C.DNA聚合酶
D.ddNTP
E.缓冲液

答案:
D
解析:

答复:本题选D。

一、双脱氧末端终止法测序体系

  用一侧引物对PCR产物进行双脱氧末端终止法测序反应,用一个ddNTP参入反应,产生长短不一的单链DNA ,然后进行SSCP分析。可分别使用两侧的PCR引物,获得一端平齐的长度不等的DNA单链。DDF方法克服了SSCP分析时因DNA长度影响SSCP显示的困难,通过一种双脱氧核苷酸产生异质性的单链DNA,使其中长度合适的DNA片段显示SSCP改变。

二、PCR反应体系

标准的PCR反应体系:
   10×扩增缓冲液      10ul
   4种dNTP混合物    各200umol/L
   引物           各10~100pmol 
   模板DNA       0.1~2ug 
    Taq DNA聚合酶    2.5u 
   Mg2+         1.5mmol/L
   加双或三蒸水至     100ul
PCR反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

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