异烟肼分子中的酰肼基具有还原性，可采用氧化还原滴定法测定其含量。

　　《中国药典》采用溴酸钾法测定，滴定反应为：1mol的溴酸钾相当于3/2mol的异烟肼。

　　测定方法为：取本品约0.2g，医|学教育网搜集整理精密称定，置100ml量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取25ml，加水50ml、盐酸20ml与甲基橙指示液1滴，用溴酸钾滴定液（0.01667mol/L）缓缓滴定（温度保持在18℃～25℃）至粉红色消失。每1ml的溴酸钾滴定液（0.01667mol/L）相当于3.429mg的异烟肼（C₆H₇N₃0）。