从土壤中分离放线菌的步骤如下：

　　1.制作高氏一号培养基，趁热注入培养皿中，凝成平板，待用。

　　2.称取土壤10克，放入装有100毫升无菌水的锥形瓶中，并加入10%酚10滴，以抑制细菌生长。振荡10分钟，制成10:1菌悬液。按照连续稀释分离法，进一步制成10:3菌悬液。

　　3.用移液管吸取0.1毫升10:3菌悬液，注入平板培养基上，用无菌玻璃刮刀将菌悬液均匀涂抹在整个培养基上。然后将培养皿倒置于25～30℃温箱中，培养7～10天，培养基上会出现微生医学教.育网搜集整理物菌落。如果菌落的硬度较大，干燥致密，且与基质紧密结合，不易被针挑起，这就是放线菌菌落。

　　4.挑取放线菌菌落，接种于斜面培养基上。