细菌L型是细胞壁缺陷从而生物学特性发生改变的一种细菌,是细菌在不利环境下种系保存的一种形式。表现为形态多形性、染色不确定性、可滤过性、渗透压敏感性,生化反应减弱特性以及对β-内酰胺类和其他作用细胞壁抗生素的抵抗性。细菌L型检查对感染病原的确定及抗生素合理选择有重要意义,多采用培养观察的方法。培养基多以心脑浸液及牛肉浸液为基础,加入蛋白胨、氯化钠,以1%的琼脂浓度制备固体培养基。培养出的L型细菌菌落表现特殊,常有油煎蛋样菌落(典型L型菌落)、颗粒型菌落(G型)和丝状菌落(F型)三种类型。
细菌L型的生物学性状有其自身的特点,如形态多形性、染色不稳定性以及生化反应减弱等,检验时应予注意,以防止工作中的漏诊。
1.标本采集:应尽量采集无杂菌污染的组织或体液标本。胸水、腹水及尿液标本,应加20%蔗糖无菌溶液,以保持高渗;血液标本应接种高渗肉汤增菌培养。如增菌肉汤出现轻度混浊或沉淀,再分离接种于L型选择平板或血平板。
2.培养方法
(1)L型检查程序:将标本接种到高渗肉汤增菌培养1~7天,然后转种L型平板和血平板37℃培养2~7天。
L型菌在L型琼脂平板上典型菌落为"荷包蛋"样,但从患者标本中新分离的L型菌落常不典型,多呈颗粒型菌落,涂片染色为多形性。必要时需经传代返祖后进一步鉴定菌种医学教|育网搜集整理。
(2)检验报告:①血平板无菌生长,L型平板有菌落生长,可报告检出细菌L型;②血平板中菌落细小,不易刮下。涂片检查细菌呈多形性,细胞壁缺损,L型平板中有L型菌落,报告检出L型;③血平板及L型平板均有菌落生长。涂片有原菌及L型两种形态特征,可报告细菌型及L型同时存在,并分别作药敏试验以供临床用药参考。