细胞化学是组织学的一个分支，是在细胞形态学的基础上研究细胞的生物化学成分，及其定位、定量及代谢功能状态的学科。在细胞形态学的基础上，运用化学反应的原理对血细胞内的各种生化组成及其代谢产物（酶类、脂类、糖类、铁、蛋白质、核酸等）作定性、定位、半定量分析的方法。

　　细胞化学染色临床上主要用于：①辅助判断白血病的细胞类型。白血病的诊断以形态学为基础，但有时仅采用瑞式染色是难以判断白血病细胞的类型的。不同的细胞系列，其所含的化学物质成分、含量及分布各不相同，随着细胞的分化阶段及病理生理状态变化，这些物质的含量也会发生相应改变。因此根据细胞化学染色结果的不同，可推断细胞的所属系列。因此临床上细胞化学染色成为辅助诊断白血病必要的、医学|教育网搜集整理有力的手段。②其他血液系统疾病的诊断和鉴别诊断。在病理情况下，血细胞的化学物质的成分及含量会发生改变，据此可以辅助疾病的鉴别诊断。如中性粒细胞碱性磷酸酶染色、铁染色等。③观察疾病的疗效和预后。当病理状况纠正后，血细胞的化学物质的成分及含量会发生改变。④发病机制的研究。

　　细胞化学染色的基本步骤为固定、显示及复染。不同的细胞化学染色，步骤不同。

　　1、固定：为了保持细胞结构及化学成分的不变，需要对细胞进行固定。根据染色的成分不同，选择合适的固定液，使细胞内的蛋白质、酶类、糖等变成不溶性物质。固定的方法有物理法和化学法，临床常用化学法固定。物理法包括干燥和火焰固定，化学法包括甲醛、乙醇、甲醇、丙酮等固定。采用蒸气或液体固定。

　　（1）蒸气固定：甲醛是常用的固定剂，极易挥发、氧化，常用40%甲醛蒸气固定。方法为在封闭的玻璃器皿中加入40%甲醛，将涂片血膜朝下，固定5～10分钟。

　　（2）液体固定：将涂片浸在甲醛、乙醇、甲醇、丙酮等固定液中，也可将两种或两种以上固定液混合，如10%甲醛甲醇液，甲醛丙酮液等。

　　2、显示：通过不同的化学反应，形成稳定的有色沉淀，显示出被检测的化学物质。常用的化学反应种类有以下几种：

　　（1）偶氮偶联法：含萘酚的底物，在相应酶的作用下释放出萘酚，后者与重氮盐结合，偶氮偶联形成有色沉淀。重氮盐的种类有坚牢蓝紫酱GBC、坚牢蓝B、六氮偶付品红等。中性粒细胞碱性磷酸酶染色、特异性酯酶染色、非特异性酯酶染色、酸性磷酸酶染色等。

　　（2）联苯胺法：过氧化物酶染色采用此法。粒细胞和单核细胞中的过氧化物酶（主要是髓过氧化物酶），能分解过氧化氢释放出新生态氧，使无色的联苯胺氧化形成有色沉淀。

　　（3）普鲁士蓝反应：细胞内外的铁与酸性亚铁氰化钾作用，形成亚铁氰化钾蓝色沉淀，如铁染色。

　　（4）雪夫反应：过碘酸氧化细胞内糖类中的乙二醇基形成乙二醛基，醛基与雪夫试剂作用，使无色品红形成红色沉淀物，如过碘酸－雪夫反应。

　　（5）金属沉淀法：某些金属化合物有颜色，形成沉淀后可以显示相应的物质，如钙－钴法中性粒细胞碱性磷酸酶染色。

　　3、复染：显色反应只是针对细胞中的特定物质，要显现细胞的形态还需要用其他染液对细胞进行复染。所选择的复染液染色的结果应使细胞结构清晰，且应与有色沉淀有明显的对比度。对细胞核着色效果较好的有中性红、甲基绿、苏木精、核固红、沙黄等，使浆着色较好的有伊红、刚果红、光绿等。

　　复染后首先观察正常应为强阳性的细胞，如过氧化物酶染色观察中性粒细胞是否强阳性，如该类细胞结构清晰，对比度良好，说明染色成功，可进一步观察计数其他细胞的染色情况医学|教育网搜集整理。

　　影响细胞化学染色结果的因素众多，主要有：标本的制备和保存方式；固定目的和固定剂的选择；酶作用底物的特异性及其选择、酶反应的最适时间、温度和PH值；抑制物如NaF、酒石酸和活化剂如钙离子、镁离子的选择和控制；储备液和缓冲剂的制备及保存方法；阳性率和半定量积分的计算方法。每一步都必须力求精准，方能获得可信的结果。

　　细胞化学染色方法众多，常用的有过氧化物酶染色、苏丹黑B染色、酯酶染色、过碘酸－雪夫染色、中性粒细胞碱性磷酸酶染色、酸性磷酸酶和抗酒酸酸性磷酸酶染色、骨髓铁染色等。目前还发展了上述染色法在同一张标本上的双染色，可提高分型的准确率。下面介绍这几种染色法的原理和临床意义。