四、瑞斯托霉素诱导的血小板聚集（RIPA）：将瑞斯托霉素加入正常富含血小板血浆中导致血小板聚集。这与血浆vWF和血小板有关。在vWD约65%患者聚集的量和聚集率降低。测定中应注意使用不同浓度的瑞斯托霉素。低浓度瑞斯托霉素时出现高血小板聚集表明vWF的异常或血小板的异常。2B型vWD和血小板型假vWD患者，0.2～0.7mg/ml瑞斯托霉素浓度可以使其富含血小板血浆聚集，有时在不加瑞斯托霉素情况下可以出现自发性聚集。正常人富含血小板血浆在此种浓度下不会聚集。1.0～1.2mg/ml为常用的浓度。高于1.2mg/ml常使1型vWD富含血小板血浆的聚集正常。医.学教育网搜集整理

　　五、vWF瑞斯托霉素辅因子活性（vWF：Ricof） 定量测定血浆 vWF在瑞斯托霉素存在时使血小板聚集的能力。使用正常洗涤无vWF血小板或福尔马林固定血小板。正常人血浆vWF：Ricof为50%～150%.本法结果与RIPA意义相同但比RIPA更敏感，特异性重复性更高。在1型vWD一般降低，也可正常。2A型和2M型显著降低，2N型正常，2B型升高，3型极低。

　　Botrocetin是一种蝰蛇毒，在vWF存在时可使血小板聚集，也可代替瑞斯托霉素用于测定vWF辅因子的活性。但在缺少大分子量vWF多聚体的2型vWD，所测得的vWF辅因子活性高于用瑞斯托霉素。

　　六、琼脂糖凝胶电泳多聚体分析：血浆vWF和血小板vWF，在SDS琼脂糖凝胶电泳时vWF多聚体在分子量大小的基础上分离，大分子量多聚体移动最慢，中分子量多聚体较快，小分子量多聚体最快。多聚体可用放射自显影或酶标技术显示。在收集标本和实验过程中应注意加入蛋白酶抑制剂。正常多聚体图形大、中、小分子量多聚体均存在，可观察到1条主带和2条或4条卫星带。血小板中可有比血浆更大分子量多聚体成分。多聚体分析在vWF分型中起着重要作用。1型vWD大、中、小分子量多聚体均存在，自显影比正常对照浅，示vWF量均匀减少。3型无多聚体出现。2型vWD多聚体图形异常变化多，可表现为大、中分子量多聚体缺如，卫星带消失等多种异常类型，是以前Ⅱ型亚型分类的重要依据。