1.检测原理
(1)清亮或微浑的脑脊液标本,可以直接计数细胞总数,或稀释后再直接计数,将结果乘以稀释倍数。
(2)可采用直接计数法计数白细胞,或稀释后再直接计数,将结果乘以稀释倍数。
(3)白细胞直接计数后,在高倍镜下根据白细胞形态特征进行分类计数。也可采用Wright染色后,油镜下分类计数。
2.方法学评价
细胞总数计数和分类计数常用显微镜计数法。白细胞直接分类法简单、快速,但准确性差,尤其是陈旧性标本,细胞变形,分类困难,误差较大。涂片染色分类法细胞分类详细,结果准确可靠,尤其是可以发现异常细胞如肿瘤细胞,故推荐使用此法。该法不足之处是操作较复杂,费时。
脑脊液细胞收集有几种方法,离心涂片法常影响细胞形态及分类。目前,玻片离心沉淀法和细胞室沉淀法已用于脑脊液细胞的浓缩和收集,其优点是收集的细胞形态完整(尤其是细胞室沉淀法),分类效果好。另外,玻片离心沉淀法阳性率高。
血细胞分析仪进行脑脊液计数和白细胞分类,此法医|学教育网搜集整理简单、快速,可以自动化。但病理性、陈旧性标本中的组织、细胞的碎片和残骸以及细胞变形等都可以影响细胞分类和计数,故重复性、可靠性有待进一步探讨。另外,蛋白质含量高,尤其有凝块的脑脊液标本容易使仪器发生堵孔现象,故不推荐使用。
3.质量控制
(1)细胞计数:①标本采集后应在1h内进行细胞计数。标本放置过久,细胞可能凝集成团或被破坏,影响计数结果。②标本必须混匀后方可进行检查,否则会影响计数结果。
(2)校正与鉴别:①因穿刺损伤血管,引起血性脑脊液,白细胞计数结果必须校正,以消除因出血带来的白细胞。②细胞计数时,应注意红细胞、白细胞与新生隐球菌的鉴别。新生隐球菌不溶于乙酸,加优质墨汁后可见未染色的荚膜;白细胞也不溶于乙酸,加酸后细胞核和细胞质更加明显;红细胞加酸后溶解。
(3)检查方法:白细胞直接计数法的试管与吸管中的冰乙酸要尽量去尽,否则可使结果偏低。若标本陈旧、细胞变形时,白细胞直接分类法误差大,可采用涂片染色分类法分类计数。
(4)染色固定:涂片染色分类计数时,离心速度不能太快,否则会影响细胞形态,可采用玻片离心法、沉淀室法收集细胞。涂片固定时间不能太长,更不能高温固定,以免使细胞皱缩,影响检验结果。
4.参考值
(1)无红细胞。
(2)白细胞极少,成人:(0~8)×106/L,儿童:(1~15)×106/L,主要为单个核细胞,淋巴细胞与单核细胞之比为7:3.
5.临床意义
脑脊液白细胞达(10~50)×106/L为轻度增高,(50~100)×106/L为中度增高,大于200×106/L为显著增高。脑脊液中血细胞增高的程度不同期临床意义也不同。