交叉配血法最重要的是ABO血型配合。必须在ABO血型相同,且交叉配血无凝集时才能输血。
1.目的:检查受血者与供血者是否存在血型抗原与抗体不合的情况。
2.原则:主侧加受血者血清与供血者红细胞;次侧加受血者红细胞与供血者血清,观察两者是否出现凝集。
3.方法
(1)盐水配血法:简便快速。主要缺点是只能检出不相配合的完全抗体,而不能检出不完全抗体。
(2)抗球蛋白法配血法:又称Coombs试验。是最可靠的确定不完全抗体的方法,但操作繁琐。抗球蛋白法配血法是最早用于检查不完全抗体的方法。
直接抗球蛋白法可检查受检者红细胞是否已被不完全抗体致敏;间接抗球蛋白法可用于鉴定Rh血型及血清中是否存在不完全抗体。本法虽较灵敏,但也有一定限度,且操作复杂,不利于急诊检查和血库的大批量工作。
试剂:抗球蛋白试剂盒:包括抗广谱、抗C3、抗IgG3种试剂。阳性对照:IgG型抗D致敏5%RhD阳性红细胞生理盐水悬液。阴性对照:正常人5%红细胞生理盐水悬液。
注意事项:①标本采集后应立即进行试验,延迟试验或中途停止可使抗体从细胞上丢失。②抗人球蛋白血清应按说明书最适稀释度使用,否则可产生前带或后带现象而误为阴性结果。③阴性对照凝集:可能是抗人球蛋白血清处理不当,仍有残存的种属抗体,或被细菌污染,应更换血清重做试验。核实阴性结果方法:在该试管中加1滴IgG致敏红细胞,如结果为阳性,则表示试管内的抗球蛋白血清未被消耗,阴性结果可靠。④阳性对照不凝集:可能是抗人球蛋白血清或用于致敏红细胞的不完全抗D血清失效,或红细胞未洗净带人球蛋白所致,应更换血清或洗净红细胞后重做。⑤如需了解体内致敏红细胞的免疫球蛋白的类型,则可分别以抗IgG、抗IgM或抗C3单价抗球蛋白血清进行试验。
(3)聚凝胺法配血法:可以检出IgM与IgG两种性质的抗体,能发现可引起溶血性输血反应的几乎所有规则与不规则抗体,故本法已逐渐推广使用。配血原理:聚凝胶分子是带有高价阳离子多聚季镀盐,医学教育网收集整理溶解后带有很多正电荷可以中和红细胞表面负电荷,有利于红细胞凝集,低离子强度溶液也能减低红细胞的Zeta电位,可进一步增加抗原抗体间的吸引力。当血清中存在IgM或IgG类血型抗体时,与红细胞发生紧密结合,此时加入枸橼酸盐解聚液以消除聚凝胶的正电荷,使IgM或IgG类血型抗体与红细胞产生凝集不会散开。如血清中不存在IgM或IgG类血型抗体,加入解聚液可使非特异性凝集消失。
(4)凝胶配血法:又称微管(板)凝胶抗球蛋白试验,此法在凝胶中进行,保持了传统抗球蛋白试验的准确、具有简便、可靠的特点,全自动血型分析仪进行交叉配血,也是利用凝胶配血。
其他可检出不完全抗体的方法有蛋白酶法、胶体介质法等。
卡式配血/血型鉴定检测法已成为国际安全输血检查的推荐方法。
4.质量控制
(1)血液标本:交叉配血的血液标本,医学教育网收集整理受血者标本应为新鲜血,供血者标本应为血袋两端刚剪下小管中的血液。
(2)选用方法:用试管法做交叉配血。
(3)溶血现象:配血管出现溶血现象,为配血不合。