薄层色谱法操作方法是主管药师考试所要掌握的知识点之一,医学教育网搜集整理如下:
1.吸附剂和展开剂的选择
(1) 吸附剂:常用有硅胶、氧化铝、聚酰胺、硅藻土等。硅胶、氧化铝的活性与含水量有关,含水量高,活性低,吸附力弱;聚酰胺表面的酰胺基可形成氢键,选择性高。
(2) 展开剂:极性较强的展开剂适用于极性较强组分的洗脱;极性较弱的展开剂适用于极性较弱组分的洗脱。加入少量酸、碱可以使极性物质斑点集中,减少拖尾,提高分离度。
选择一般原则是,分离极性较强组分时选用活性低的薄层板,以极性强的展开剂展开。分离弱极性组分时,宜选用活性高的薄层板,以极性弱的展开剂展开。调整待测组分Rf0.3~0.5范围内。
2.薄层板制备:1份固定相与3份水混和涂布,110℃烘30分钟。
3.点样与展开:点样一般为直径2~4mm圆点,距底2.0cm;展开距离一般为10~15cm.
4.斑点定位:有色可直接观察;有荧光在紫外灯下观察;喷洒显色剂使组分显色。