1.空斑形成细胞（plaque formingcell，PFC）检测

是体外检测B细胞功能的一种方法。该法最早用于实验动物的PFC测定。是以SRBC作为抗原免疫小鼠，从免疫小鼠脾脏分离淋巴细胞或直接用脾细胞，将其与高浓度SRBC混合于琼脂中，经37℃，5%CO2温育后，在补体参与下抗体形成细胞周围的SRBC溶解而形成溶血小区，即溶血空斑（plaque）。一个空斑代表一个抗体形成细胞，空斑的数量表示抗体形成细胞的多少。IgM参与本反应，固定补体能力强，可直接激活传统途径，导致SRBC溶解，称直接法。若检测其他类别免疫球蛋白的抗体形成细胞，需在试验系统中加入相应的第二抗体才能使SRBC溶解形成空斑，称间接空斑形成试验。近年来，已应用SPA致敏的SRBC结合抗人球蛋白来检测人的抗体形成细胞，此法称SPA-SRBC溶血空斑试验。在此检测系统中加入抗人Ig，能与受检细胞产生的Ig结合成复合物，并通过复合物中抗人IgFc段与致敏SRBC上的SPA结合，激活补体而使SRBC溶解。空斑形成细胞的检测，有助于免疫应答动力学的研究和探讨药物对机体免疫状态的影响。是目前研究B细胞抗体产生功能的重要手段。

2.定量溶血分光光度法（quantitative hemolysis spectrophotometry，QHS）

该法又称B细胞介导的红细胞定量溶血分光光度法，是根据溶血空斑试验的原理衍化而来，可用以测定由B细胞产生和分泌的抗体裂解红细胞所释放的血红蛋白（以吸光值表示），从而反映机体的体液免疫功能。试验时，将免疫的脾细胞与SRBC及新鲜豚鼠血清等体积混合，于37℃水浴1小时，离心后测上清吸光值，其与产生抗体的量成正比。

3.ELISA-空斑试验（ELISA-plaque assay）

又称酶联免疫斑点试验（enzyme linked immunospot，ELISPOT）。该法与ELISA不同之处是医学教育网搜|集整理，加入的待检标本是细胞，而非可溶性物质；所使用的底物可形成不溶性终产物。原理和步骤参见图18.8.ELISPOT不仅可应用于B细胞分泌抗体功能的测定，也能检测分泌细胞因子的T细胞和巨噬细胞。现已有应用该技术于计数类风湿因子分泌细胞的报道，但尚未在临床推广。