方法名称： 复方草珊瑚含片－异秦皮啶的测定－高效液相色谱法

应用范围： 本方法采用高效液相色谱法测定复方草珊瑚含片中异秦皮啶的含量。

本方法适用于中成药复方草珊瑚含片。

方法原理： 供试品分散于水中，用氯仿提取，提取液蒸干，残渣用甲醇溶解，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长344nm处检测异秦皮啶的峰面积，计算出其含量。

试剂： 1 甲醇

2 乙腈

3 氯仿

4 磷酸溶液，0.1%

仪器设备： 1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按异秦皮啶峰计算应不低于1200。

1.3 紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：乙腈 0.1%磷酸溶液 = 20 80

2.2 检测波长：344nm

2.3 柱温：室温

试样制备： 1.称取供试品

取本品10片，精密称定，求出平均片重，研细，精密称取约1g，为供试品。

2.对照品溶液的制备

精密称取异秦皮啶适量，加甲醇制成每1mL含0.004mg的溶液。

3.供试品溶液的制备

供试品加水10mL，超声处理（功率300W，频率25kHz）10分钟，转移至分液漏斗中，加氯仿振摇提取5次（必要时离心），每次10ml，合并氯仿提取液，蒸干，残渣用甲醇溶解，转移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀, 作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤： 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长344nm处测定异秦皮啶（C11H10O5）的峰面积，计算出其含量。

参考文献： 中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p533。