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微生物培养基手册大全

2012-09-06 17:36  来源:医学教育网    打印 | 收藏 |
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  1、营养琼脂(普通琼脂)

  成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏汤) 100毫升琼脂(视天气,琼脂质量而定)

  制法:将上物加热溶解,补足水,调ph至7.6,过滤分装121℃,高压灭菌15分钟。

  用途:作普通琼脂平皿。

  2、血琼脂平板(BA)

  制法:取营养琼脂(PH7.6),加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀,立即倾注于平板或分装试管,制成斜面备用。

  用途:1. 一般棉拭子均接种此培养基。

  2.尿液,脓液

  3.分离细菌标本用。

  3、基础培养基 (肉膏汤BB)

  成份:蛋白胨 10克     牛肉膏 5克 氯化钠 5克     水     1000毫升

  制法:将以上各物称好,加水煮沸溶解,用1NNOH校正PH至7.6,过滤分瓶,121℃高压灭菌,20分钟备用。

  用途:1 作耐药试验,增菌用分装小管。

  2 作普通琼脂斜面。

  4、血液培养基(大管肉汤培养基)

  成份:1 新鲜牛肉浸液 1000毫升

  2 PABA(对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕) 1g% 1毫升

  3 MgSO4 [相当于0.493/100毫升]    49.3% 1毫升

  4 枸椽酸钠                      0.3g

  制法:1 将1号,4号混合液,2号,3号液分装高压灭菌。

  2 取灭菌1,4号混合液用无菌法加入PABA,MgSO4,再分管,行无菌试验三天方可使用。

  用途:作血,骨髓培养用。

  5、肠道杆菌培养基(伊红美兰琼脂)

  成份: 蛋白胨 10克       乳糖     10克    氯化钠 5克       琼脂     25(22)克     水    1000毫升     2%伊红溶液20毫升     0.5%美兰溶液 20毫升

  制法:将蛋白胨,氯化钠琼脂称好,加水1000毫升使溶解,校正PH7.4过滤,补足失水,加入2%伊红溶液20毫升,0.5%美兰溶液20毫升,(115℃高压20分钟),冷却至50℃左右倾注平板,凝固后存冰箱备用。(高压以后方可再加乳糖)

  用途:用作分离沙门氏,志贺氏菌属,也作菌群调查。

  6、罗文斯坦培养基

  成份:磷酸二氢钾     2.4克       硫酸镁 0.24克

  枸椽酸钠    0.6克       天门冬素 3.6克

  纯甘油(丙三醇) 12毫升       水     600毫升

  马铃薯粉    30克           鸡蛋 1000毫升(约3公斤)

  2%孔雀绿水溶液 20毫升

  制法:1 除鸡蛋外(还有孔雀绿)。可将其它物品称好,放入大三角瓶包扎好,高压灭菌。

  2 鸡蛋用75%酒精泡30分钟,灭菌法打蛋,倒入盛有玻璃珠的灭菌三角烧瓶内充分将鸡蛋摇散。

  3 将各成份按比例配好,分装每管约5毫升。

  4 间歇灭菌第一次90℃1小时,第二次80℃半小时,第三次80℃半小时(或放85℃烤箱内连续二次)。

  质控标准: 1 灭菌试验合格。

  2 接种结核杆菌要求两星期生长良好。

  用途:作结核分枝杆菌培养用。

  7、结核半固体培养基

  成份:磷酸氢二钠    19克           硫酸镁     0.6克

  磷酸二氢钾    2.5克       天门冬素 5克

  1%孔雀绿    1.5克           甘油    20毫升

  吐温80(10%) 5毫升           水    1000毫升

  枸椽酸钠       2.5克           动物血清 100毫升

  琼脂           1.5克(80小时用甲醇去脂)

  1%孔雀绿    0.78毫升    吐温80(10%) 5毫升

  加动物血清     100毫升

  制法: 1 除血清外将上述药品均称好,放入煮沸溶解,调PH7.2

  2 分管(每管约10毫升)包扎好,高压,121℃半小时灭菌。

  3 待冷后无菌法加无菌血清(绵羊血或兔血)每管约1毫升备用。

  4 去除琼脂方法:取琼脂若干或于三角烧瓶中加甲醇于琼脂1毫升用塞密封,放37℃温浴80小时,每天摇动一次,冷却后到时取出用滤纸过滤,待琼脂自然冷却后备用。

  质控标准:1无菌实验合格。

  2琼脂硬度合适而清亮。

  3接种标准结核杆菌用,强度合适即可用。

  用途:培养结核杆菌用。

  8、亚碲酸钾血琼脂平板

  成份:琼脂基础 100毫升    1 0%葡萄糖     2毫升

  1%亚碲酸钾 4.5毫升    绵羊血    10毫升

  制法:1将琼脂基础溶解好,加入羊血。

  2马上加热使成咖啡色后,稍冷再加入10%葡萄糖2毫升与1%亚碲酸4.5毫升混合后倒入无菌平板,凝固后存冰箱备用。

  质控标准:接种白喉杆菌生长良好,其它革兰氏阴性菌均抑制生长。

  用途:供培养及鉴别白喉杆菌用。

  9、米培养基

  成份:白米    20克           水     1000毫升

  琼脂    20克       吐温80 10毫升

  制法:1将20克米加水200毫升煮沸45分钟,煮时将容器盖好。

  2用纱布过滤,只要米汤,不要饭,加水至1000毫升。

  3加琼脂20克,吐温-80 10毫升煮溶,分装中型管(每管约3毫升),包扎好,高压,121℃半小时,消毒备用。

  质控标准:1灭菌。

  2要求清亮。

  3接种白色念珠菌17-24小时生长良好,并产生厚膜孢子。

  用途:培养白色念珠菌用。

  10、蛋白胨水培养基

  成份:蛋白胨 1克    氯化钠     0.5克

  水加至 100毫升     PH调至     7.8

  制法:把以上各物称好溶于水,调节PH7.6分装消毒备用。

  质控标准:1 放置37℃无菌生长。

  2 接种大肠杆菌24小时生长良好。

  3 可作中国兰平板基础液。

  可作靛基质基础液(作此试验需要色氨酸蛋白胨)。

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