血清总蛋白测定器材:
血清总蛋白测定一般采用双缩脲比色法,它是目前首先推荐的蛋白质定量方法。此法的原理是蛋白质分子中的肽键在碱性条件下与二价铜离子(Cu2+)作用生成蓝紫色的化合物,这种颜色反应强度在一定浓度范围内与蛋白质含量成正比,经与同样处理的蛋白标准液比较,即可求得蛋白质含量。此反应的优点是清、球蛋的反应性相近,操作简单,重复性好,干扰物质少,为首选的常规方法,其缺点是灵敏度较低。
分光光度计试剂:
1.6mol/L NaOH溶液称取NaOH2409.溶于新鲜制备的蒸馏水约800ml中,定容至lL,贮于有盖塑料瓶中。
2.双缩脲试剂称取硫酸铜结晶(CuS04•5H,O)39溶干新鲜制备的蒸馏水500ml中,加入酒石酸钾钠(NaKC4H406•4H,O,用以结合Cu2+,防止CuO在碱性条件下沉淀)99和KI(防止碱性酒石酸铜自动还原并防止Cu20的离析)Sg.待完全溶解后,在搅拌下加入6mol/L NaOH溶液100ml,并用蒸馏水定容至1L,置塑料瓶中盖紧保存。此试剂室温下可稳定半年医|学教育网整理,若贮存瓶中有黑色沉淀出现,则需要重新配制。
3.60—709/L蛋白质标准液可用定值参考血清或标准白蛋白作标准。