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主讲:网校老师 6月11日19:00-21:30
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主讲:网校老师 6月12日19:00-21:00
详情医学教育网小编整理了“补体的检测及应用”相关知识供大家参考学习,希望对大家有所帮助!
补体Complement:是存在于人和动物血清中的一组具有酶活性的球蛋白,一般情况下处于未激活状态。
补体的特性
稳定性差,各种理化因素都可使之失活:如酸、碱、紫外线照射、剧烈震荡等。
实验室灭活补体的条件为:56℃30分钟,室温2-3天也可自然失活,补体检测必须用新鲜血清。
补体的组成
1.补体的固有成分:C1-C9,其中C1又包括C1q、C1r、C1s,共9种成分11种蛋白分子。其中C9的分子量最小、C3的含量最高。
2.补体的调节蛋白:如C4调节蛋白、C1抑制物、S蛋白等。
3.补体受体:如C1qR、C3aR等。
补体的激活:
经典激活途径:又称C1途径。激活剂:IgG、IgM形成的AgAb复合物;参与成分:C1-C9;激活过程:这是一个连锁反应,缺少其中任何一个组分,连锁反应都不能进行下去。旁路激活途径:又称C3途径。激活剂:脂多糖、酵母多糖、IgG4和IgA的聚合物(提供接触表面); 参与成分:C3、C5-C9、B因子、D因子、P因子。
甘露糖结合凝集素途径:又称MBL途径。医学教育网|搜集整理在感染早期,常采用前两个途径,产生Ab后采用第一个途径。
补体的生物学作用
溶菌、溶细胞作用(MAC效应);调理作用(C3b、C4b和iC3b);免疫黏附作用(C3b、C4b);炎症介质作用:趋化作用(C3a,C5a)过敏毒素作用(C3a,C4a,C5a)。
补体的检测
功能检测:总补体活性的检测、单一补体活性的检测(溶血试验)。
量的检测:单一补体量的检测(免疫比浊法或单扩法)。
溶血试验
SRBC+兔抗SRBC抗体(溶血素)+新鲜血清(提供补体)——启动经典激活途径(溶血)。
指示系统:绵羊红细胞和溶血素。
补体来源:多只豚鼠的混合血清。
总补体活性检测:CH50试验。
原理:组成和功能完整的补体系统能使致敏羊红细胞发生溶血;羊红细胞的溶血程度与补体的活性成正比。
概念:在50%溶血附近(30%-70%之间),稍微改变补体量,溶血程度变化明显,因此以50%溶血率来判定终点较100%更为敏感。
检测结果处理:最后找到与制备好的50%溶血标准管比较,取吸光度值最接近的一管,则CH50(U/ml)=1/血清用量X稀释倍数。
总补体活性参考范围:50-100U/ml.
单一补体活性的检测(溶血试验),常用于检测C3、C4、C1q、B因子等。
单一补体量的测定:采用免疫比浊法或单扩法,常检测C3(含量1200-1300ug/ml)。
补体检测的临床意义
补体量↑:多见于急性炎症感染、组织损伤、癌肿。
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