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免疫测定——流式细胞分析法

2020-04-14 18:01 来源:医学教育网
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免疫测定——流式细胞分析法,主要用于那种情况的检验呢?快来跟着小编了解一下吧!

主要用于细胞内细胞因子和细胞表面黏附分子的检测,通过特异性的荧光抗体染色,能简单、快速地进行检测,精确判断不同细胞亚群的细胞因子和膜分子的表达情况。根据荧光抗体的性质,荧光抗体染色分直接法和间接法。直接法较为常用,其敏感性虽不及间接法,但特异性强。

可区分具有不同分泌特性的细胞亚群,如Th1、Th2细胞等。

检测细胞内细胞因子时,主要包括以下基本步骤:

1.分离和培养待检细胞。

2.细胞固定:常用的细胞固定剂为4%多聚甲醛。

3.封闭非特异性结合位点:即用含5%脱脂奶粉和钙、镁离子的PBS溶液,重悬已固定的细胞。

4.染色与分析:即用荧光素标记的细胞因子特异性单克隆抗体做荧光抗体染色,用流式细胞仪分析荧光阳性细胞百分比和荧光强度。此外,若应用不同荧光素标记两种以上细胞因子的单克隆抗体,则可同时检测同一细胞内2种以上不同的细胞因子。

以上是小编为大家整理的内容,希望对大家有所帮助,更多关于临床检验主管技师的资讯请关注医学教育网! 

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