T细胞功能检测原理是什么呢?为了帮助更多考生了解,医学教育网为大家搜集整理如下:
(一)T细胞增殖试验
1.原理:T细胞在体外受到有丝分裂原或抗原的刺激后,细胞增殖,并转化为淋巴母细胞。因此,淋巴细胞增殖反应又称淋巴母细胞转化。
2.刺激物:植物血凝素(PHA)、刀豆素A(ConA)和美洲商陆(PWM)、白喉类毒素、破伤风类毒素、纯化蛋白衍生物(PPD)和白色念珠菌等。
3.方法学:检测T细胞增殖反应的方法有:
(1)形态学检查法:运用普通光学显微镜,简便易行。缺点是依靠肉眼观察形态学变化,判断结果易受主观因素影响,重复性和准确性较差。
(2)3H-TdR掺入法:敏感性高,客观性强,重复性好,但需一定设备条件,及存在放射性核素污染问题。
(3)MTT比色法:本方法的敏感性虽不及3H-TdR掺入法,但操作简便,无放射性污染。较常采用。
(二)T细胞分泌功能测定
通过对于T细胞分泌细胞因子的含量、生物学活性和基因表达水平,以反映T细胞功能。
(三)T细胞介导的细胞毒试验
常选用可传代的已建株的人肿瘤细胞,与待检淋巴细胞混合,观察肿瘤细胞杀伤的情况。是评价机体细胞免疫水平的常用指标,特别是测定肿瘤患者CTL杀伤肿瘤细胞的能力,常作为判断预后和观察疗效的指标之一。
(四)体内实验
1.特异性抗原皮肤试验:常用结核菌素皮肤试验。其他皮试抗原还有白色念珠菌素、皮肤毛癣菌素、腮腺炎病毒等。若受试者从未接触过该抗原,则不会出现阳性反应,因此阴性者也不一定表明细胞免疫功能低下。往往需用两种以上抗原进行皮试。
2.PHA皮肤试验:将定量PHA注射到受试者前臂皮内,可非特异性刺激T细胞发生母细胞转化,呈现以单个核细胞浸润为主的炎性反应。PHA皮肤试验敏感性高,比较安全可靠,临床常用于检测机体的细胞免疫水平。
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