什么是活化生物素呢?快来跟着小编了解一下吧!
利用生物素的羧基加以化学修饰可制成各种活性基团的衍生物,称为活化生物素。
(一)标记蛋白质氨基的活化生物素
将生物素与N-羟基丁二酰胺在碳二亚胺的作用下进行缩和,生成BLAHS。BLAHS中的-C=0基团与蛋白质分子中赖氨酸的氨基形成肽键,从而标记上生物素。
(二)标记蛋白质醛基的活化生物素有两种:生物素酰肼(BHZ,用于偏酸性糖蛋白的生物素标记)和肼化生物胞素(BGHZ)。
(三)标记蛋白质巯基的活化生物素:3-(N-马来酰亚胺-丙酰)-生物胞素(MPB)是能特异地与蛋白质巯基结合的活化生物素试剂。
(四)标记核酸的活化生物素:生物素戊酸侧链通过酰胺键与核酸分子相连,构成生物素标记的核酸探针。
1.光敏生物素:用于DNA或RNA的标记。
2.生物素脱氧核苷三磷酸:将生物素与某种脱氧核苷酸连接成活化生物素。用缺口移位法掺入到双链DNA中。
3.BNHS和BHZ:与核酸胞嘧啶分子中的N-4氨基交联,使核酸分子生物素化。
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