酶标记抗体或抗原的制备,跟着小编来学习一下吧!
标记方法应符合:技术方法简单、产率高,且重复性好;标记反应不影响酶和抗原或抗体的活性;酶标志物稳定,应避免酶、抗体(抗原)以及酶标志物各自形成聚合物等。
1.戊二醛交联法:同源双功能交联剂。
(1)一步法:连接AP。
①优点:操作简便、有效,重复性好。
②缺点:交联时分子间比例不严格,大小不一,影响效果。
(2)二步法:连接HRP。
先将HRP与戊二醛作用,透析除去戊二醛,在pH9.5缓冲液中再与抗体作用而形成酶标抗体。
优点:酶标志物质量较均一,标记效率也较一步法高。
2.改良过碘酸钠法
HRP标记抗体或抗原的最常用方法。
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