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如何鉴定荧光抗体呢?快来跟着小编了解一下吧!
1.荧光素与蛋白质的结合比率 荧光素与蛋白的过量结合是非特异荧光着色的来源之一,而未结合者有抑制特异性荧光抗体反应的作用。
荧光素结合到蛋白上的量的重要指标是荧光素与蛋白质的结合比率(F/P)。比值越大,则抗体结合的荧光素越多,反之则结合越少。一般用于组织切片的荧光抗体,其F/P=1.5为宜,用于活细胞染色F/P=2.4为宜。
2.抗体效价 可以采用双向免疫扩散试验测定,抗原含量为1g/L时,抗体效价>1:16者较为理想。
3.抗体特异性①吸收试验:向荧光抗体中加入过量相应抗原反应后,再用于阳性标本染色,应不出现明显荧光;②抑制试验:阳性标本先与相应未标记抗体反应,洗涤后,再加荧光抗体染色,荧光强度应受到明显抑制。
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