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斑点免疫渗滤试验的原理和方法,快来跟着小编了解一下吧!
用于检测各种传染病的抗体和肿瘤标记物等,以及用于检测尿液HCG的“金标”早孕诊断试剂。
(一)原理:将抗原或抗体点加在固相载体硝酸纤维素薄膜上,将膜贴于吸水材料上,依次在膜上滴加标本、免疫胶体金及洗涤液等试剂进行抗体或抗原反应,过量试剂很快渗入吸水材料中。
抗原抗体反应后,形成大分子胶体金复合物,从而使阳性结果在膜上呈现红色斑点。液体通过微孔滤膜时,渗滤液中的抗原或抗体与膜上的抗体或抗原相接触,起到亲和层析的浓缩,达到快速检测的目的,同时洗涤液的渗入在短时间内即可达到彻底洗涤的目的,简化了操作步骤。
(二)方法类型
1.双抗体夹心法测抗原:用抗体结合在微孔滤膜中央,滴加待检标本,抗原抗体反应后,滴加金标抗体,加洗涤液洗涤后,阳性者即在膜中央呈红色斑点。
2.间接法测特异性抗体:用抗原包被在微孔滤膜上,滴加待测标本,滴加洗涤液洗涤后,滴加金标抗抗体,加洗涤液洗涤后,阳性者即在膜中央呈红色斑点。该法由于血清标本中非目的IgG的干扰,易导致假阳性结果。
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