尿液蛋白质检查的检测方法及评价是什么?为了帮助各位考生了解,医学教育网搜集整理如下:
1、尿蛋白定性试验为蛋白尿的过筛试验。
(1)试带法:利用pH指示剂的蛋白误差原理。本法对清蛋白较敏感,对球蛋白的敏感性仅为清蛋白的1/100~1/50,且可漏检本周蛋白。尿液pH值增高也可产生假阳性。本法快速、简便、易于标准化,适于健康普查或临床筛检。
(2)加热乙酸法:为传统的经典方法。加热煮沸使蛋白变性、凝固,然后加酸使尿液pH接近尿蛋白质等电点(pH4.7),在含有适量无机盐状况下,蛋白质更易于变性下沉,同时可消除某些磷酸盐(如无定形磷酸盐、铵镁磷酸盐等)在碱性条件下易析出结晶、造成混浊的干扰。
【操作过程】加热-加酸-再加热
①在试管内加清晰尿液至管高2/3处,浑浊尿液标本应离心取上清液再试验。
②用木夹夹持(或手持)试管下1/3处,加热煮沸试管上1/3处内的尿液。
③将试管上部加热处尿液与试管下部未加热尿液比较,观察有无浑浊变化。
④在试管中加入5%冰乙酸2滴,再煮沸尿液,立即观察结果,结果的判断及报告形式同磺基水杨酸法。
(3)磺基水杨酸法:又称磺柳酸法。操作简便、反应灵敏、结果显示快,与清蛋白、球蛋白、糖蛋白和本周蛋白等均能发生反应;敏感度达0.05g/L,因而有一定的假阳性。被NCCLS作为干化学法检查尿蛋白的参考方法,并推荐为检查尿蛋白的确证试验。
根据反应的混浊程度,作出尿蛋白的定性或半定量判断:
阴性(-,不显浑浊,尿液外观仍清晰透明)
微量(±,轻微浑浊,隐约可见)
阳性(+,明显白色浑浊,但无颗粒出现)
阳性(++,稀薄乳样浑浊,出现颗粒)
阳性(+++,乳浊样,有絮片状沉淀)
阳性(++++,絮状浑浊,有大凝块下沉)
2.尿蛋白定量试验:沉淀法、比色法、比浊法、染料结合法、免疫测定法和尿蛋白电泳法等。
比色法:常用双缩脲比色法,为蛋白质定量测定经典方法。本法显色稳定,对清蛋白、球蛋白的反应都有同样的灵敏度,但灵敏度低。
染料结合法:方法有考马斯亮蓝法、丽春红S法等。考马斯亮蓝染料易沉着在比色杯上,应注意洗脱。
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