在ELISA（酶联免疫吸附测定）检测中，间接法是一种常用的检测方式。其基本原理是利用抗原-抗体之间的特异性结合反应来检测样本中的目标物质。具体步骤如下：
1. 首先将已知的抗原固定在固相载体上（如微孔板），这个过程称为包被。
2. 然后加入待测血清或其它样本，如果其中含有能与上述抗原特异性结合的目标抗体，则会形成抗原-抗体复合物。
3. 接着洗涤去除未结合的成分，以减少非特异性的背景干扰。
4. 再次加入酶标记的二抗（即针对待测物种IgG Fc段的抗体），该二抗能够与第一步形成的抗原-样本抗体复合物中的抗体部分相结合。
5. 经过洗涤去除未结合的酶标二抗后，加入底物溶液。若存在目标抗体，则酶标记的二抗会催化底物发生颜色变化，通过检测吸光度值来判断和定量目标抗体的存在。
间接法主要用于测定血清中特定类型的抗体（如IgG、IgM等），具有较高的灵敏度和特异性，在临床诊断、流行病学调查等领域有着广泛的应用。