网织细胞计数仪测定网织细胞数量的步骤是什么呢?没掌握的考生快来跟着小编学习一下吧!
【操作方法】
1.显微镜试管法操作
(1)加染液:于试管中加入10g/L煌焦油蓝生理盐水溶液2滴,再加新鲜血2滴,立即混匀,置37℃下15~20min。
(2)制片:取1小滴制成薄血涂片,自然干燥。
(3)观察:在低倍镜下选择红细胞分布均匀的部位进行观察。
(4)计数:在油镜下计数至少1000个红细胞中网织红细胞数。
(5)计算:
网织红细胞分数=(计数的网织红细胞数)/1O00,
网织红细胞绝对值(×109/L)=红细胞数×1012/L×网织红细胞分数。
2.显微镜法注意事项
(1)网织红细胞必须活体染色,WH0推荐使用新亚甲蓝染液,其染色力强且稳定。煌焦油蓝染液操作简单、费用低廉,但易产生沉淀、工作效率不高、精度差。染液与血液比例以1:1为宜,严重贫血时,可适量增加血量。
(2)为提高网织红细胞计数精度和速度,ICSH推荐使用Miller窥盘,方法是将Miller窥盘置于目镜内,选择红细胞散在且分布均匀的部位。
(3)用小方格(A)计数红细胞,大方格(B)计数网织红细胞
(4)注意鉴别网织红细胞与HbH包涵体。Ret为蓝绿色网状或点粒状物质,分布不均,HbH包涵体为蓝绿色圆形小体,均匀散布于整个红细胞内。
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