连续监测法中酶活性浓度的计算有哪些注意事项?跟着小编来学习一下吧!
在酶反应过程中,用仪器监测某一反应产物或底物浓度随时间的变化所发生的改变,通过计算求出酶反应初速度的方法。
连续监测法优点之一是计算方便,不需作标准曲线或标准管,用分光光度计监测酶反应过程时,很容易求出反应体系中每分钟吸光度变化,根据摩尔吸光系数可求出△A(相当测定物质变化的微摩尔数)。
计算中要考虑标本的稀释倍数,还应考虑光径不同时对△A的影响。
ε为微摩尔(线性)吸光体系
△A为吸光度变化
ν为标本体积(ml)
V为反应体系体积(ml)
L为光径(cm)
后面几项皆为常数,叫做酶活力浓度测定转化因子:
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