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（1）标本采集：血液、瘀斑渗出液、脑脊液、鼻咽分泌物。

注：因本菌能产生自溶酶，易自溶，故采集的标本不宜置冰箱，应立即送检。

1）直接涂片检查：取脑脊液离心后沉淀物涂片或刺破瘀斑血印片，干燥固定后革兰染色。若发现中性粒细胞内（或胞外）革兰阴性双球菌，呈肾形成对排列，可初报。

2）分离培养：将标本增菌培养液直接接种于血琼脂平板、巧克力琼脂或EPV琼脂，置5%～10% CO2环境中，35℃培养18～24h后可见圆形、灰褐色、湿润、光滑、边缘整齐、直径1～2mm的小菌落。

3）鉴定：

①细菌染色形态：G-，菌体呈肾形，坦面相对，成对排列。

②氧化酶试验（+）

③触酶试验（+）

④分解葡萄糖、麦芽糖产酸不产气。

⑤荚膜多糖抗原直接凝集试验

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