双向扩散试验是检验职称考试会涉及的内容,为了帮助检验职称考生了解,助力检验职称考生复习,医学教育网为大家整理如下:
【知识点名称】双向扩散试验
【进阶攻略】该知识点需熟练掌握沉淀线的有无、形态和位置与抗原抗体之间的关系。
【知识点详情】
双向扩散试验是让抗原和抗体双方都在琼脂中各自向对方扩散,在比例恰当之处形成抗原抗体沉淀线,观察这种沉淀线的位置、形状以及对比关系,可对抗原或抗体进行定性分析。根据试验形式也可分为试管法和平板法两种。
(一)试管法
(二)平板法 是鉴定抗原抗体的最基本、最常见的方法之一。根据沉淀线的有无、形态和位置可作如下分析:
1.抗原或抗体的存在与否以及相对含量的估计 沉淀线的形成是根据抗原抗体两者比例所致,沉淀线如果靠近抗原孔,则表示抗体含量较大;沉淀线如果靠近抗体孔,则表示抗原含量较大;不出现沉淀线则表明无对应的抗体或抗原或者抗原过量。
2.抗原或抗体相对分子量的分析 抗原或抗体在琼脂内自由扩散,其速度受分子量的影响。分子量小者扩散快,反之则较慢。由于慢者扩散圈小,局部浓度则较大,形成的沉淀线弯向分子量大的一方;如果两者分子量大致相等,则形成直线。
3.抗原性质的分析 两种受检抗原的性质可完全相同、部分相同或完全不同。三种情况在双向扩散试验中表现如下:两条沉淀线互相吻合相连,表明抗体与两个抗原中的相同表位结合而沉淀,两个抗原相同;沉淀线呈部分相切,说明两个抗原之间有部分相同;两条沉淀线交叉而过,说明两个抗原完全不同。
4.抗体效价的滴定 双向扩散试验是抗血清抗体效价滴定的常规方法。固定抗原的浓度,稀释抗体;或者抗原和抗体双方皆作不同的稀释,经过自由扩散,形成沉淀线,以出现沉淀线最高的抗体稀释度为该抗体的效价。
5.抗原或抗体纯度鉴定 用混合抗原或抗体鉴定抗体或抗原,出现一条沉淀线说明待测抗原或抗体纯,出现多条沉淀线说明不纯。
双向扩散试验简单易行,用途广泛,但该技术灵敏度低,出现结果慢,不能精确定量,这些弱点在相当程度上限制了它的应用。
【知识点随手练】
一、单项选择题
1.关于双向扩散试验下列错误的是
A.平板法是鉴定抗原抗体的最基本、最常见的方法之一
B.不出现沉淀线则表明无对应的抗体或抗原或者抗原过量
C.抗原或抗体在琼脂内自由扩散,其速度受分子量的影响
D.双向扩散试验是抗血清抗体效价滴定的常规方法
E.双向扩散试验简单易行,用途广泛,该技术灵敏度高,出现结果快,能精确定量
2.双向琼脂扩散试验中,若抗原抗体含量相同,但抗原的分子量比抗体大,则沉淀线应为
A.靠近抗原孔,且弧线弯向抗原侧
B.靠近抗原孔,且弧线弯向抗体侧
C.靠近抗体孔,且弧线弯向抗原侧
D.靠近抗体孔,且弧线弯向抗体侧
E.居于抗原孔和抗体孔中间,且弧线弯向抗原侧
【知识点随手练参考答案及解析】
一、单项选择题
1.【答案及解析】E。双向扩散试验简单易行,用途广泛,但该技术灵敏度低,出现结果慢,不能精确定量,这些弱点在相当程度上限制了它的应用。
2.【答案及解析】E。沉淀反应中,沉淀线靠近抗原孔,提示抗体含量大;靠近抗体孔,提示抗原含量多。抗原抗体在琼脂内扩散速度受分子量的影响,分子量小的扩散快。由于速度慢者扩散圈小,局部浓度大,形成的沉淀线弯向分子量大的一方。
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