主管检验师：《答疑周刊》2017年第29期：

1.【问题】放射免疫和免疫放射是测定抗原还是抗体?

【解答】放射免疫分析（RIA）是放射免疫技术最经典的模式。它是以放射性核素标记抗原与反应系统中未标记抗原竞争性结合特异性抗体为基本原理来测定待检样品中抗原量的一种分析方法。而免疫放射分析（IRMA）是用放射性核素标记的过量抗体与待检测抗原直接结合，采用固相免疫吸附载体分离结合与游离标记抗体的非竞争性放射免疫分析。二者的异同点如下：

①标记物 RIA 以放射性核素标记抗原；IRMA 则是标记抗体。

②反应速率 IRMA 反应速度比RIA 快。

③反应原理 RIA 为竞争抑制性结合，反应参数与待检抗原量成反相关；IRMA为非竞争结合，反应参数与待检抗原成正相关。

④特异性 IRMA 特异性较RIA高。

⑤灵敏度和检测范围 IRMA测定的灵敏度明显高于RIA， IRMA标准曲线工作范围较RIA宽1～2个数量级。

⑥其他 RIA 所用抗体为多克隆抗体，对亲和力和特异性要求较高，但用量很少；IRMA 为试剂过量的反应，对抗体亲和力的要求不及 RIA，但用量大。

此外，RIA 可以测量半抗原，但IRMA只能测定至少有两个以上表位的抗原。

2.【问题】细菌在酸性，碱性，弱酸性环境种都带负电荷吗？

【解答】在接近中性的环境中细菌都带有负电荷，易与带正电荷的碱性染料结合，故常用碱性苯胺染料如美蓝、结晶紫、碱性复红等染色细菌。

1.碱性染料：电离后显色离子带正电荷，易与带负电荷的被染物结合。由于细菌的等电点在pH2～5之间，在碱性、中性、弱酸性的环境中细菌均带负电荷，易与带正电荷的染料结合而着色。常用的染料有碱性复红、结晶紫、美蓝等。

2.酸性染料：电离后显色离子带负电荷，易与带正电荷的被染物结合。一般情况下细菌都带有负电荷故不易着色。如果降低菌液的pH使细菌带正电荷，则可被染色。酸性染料通常用来染细胞浆，而很少用于细菌的染色。常用的酸性染料有伊红、刚果红等。

3.复合染料（中性染料）及荧光染料：复合染料是碱性染料和酸性染料的复合物，如瑞氏染料（伊红美蓝）、姬姆萨染料（伊红天青）等；荧光染料如荧光标记的抗体，荧光素常用异硫氢基荧光素。这些染色常用于某些特殊的染色技术中。

3.【问题】为什么荧光抗体跟特异性的抗原发生反应后，荧光强度就消失？

4.【问题】内生肌酐清除率计算方法？

【解答】Ccr = [尿肌酐浓度(μmol/L)×每分钟尿量(ml/min)]/血浆肌酐浓度(μmol/L)

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