有条件尽量用超纯水，没条件就用双蒸水。PH无特别要求
可最近的实验确实碰到了不同时期也就是不同PH的水交叉制胶体金时，竟然保存时间长至PH为中性的水导致制备失败的，而新鲜的PH且酸性约5-5.5的是成功的，为什么呢？有人能帮忙解答一下吗？
怎么没有人帮忙呀？
试剂配制必须保持严格的纯净，所有试剂都必须使用双馏水或三馏水并去离子后配制，或者在临用前将配好的试剂经超滤或微孔滤膜（0.45µm）过滤，以除去其中的聚合物和其它可能混入的杂质。
配制胶体金溶液的pH以中性（pH7.2）较好。
有没有人明示一下，水的PH对金溶液有关系吗？急求回复
请教：一般烧好的胶体金溶液的PH值是多少？
原来测过一般好像都是在6附近的，有人测过吗？
我测过,烧完后金PH大概5点多，我用的水是超纯水.
可能跟你煮的颗粒有点关系的吧,还没做过颗粒大小影响烧金后PH的实验.
现在我们用的是三蒸水，这样的行吗？
我新做的纸条是这样的 有下浅上深的现象 请问各位大虾如何解决
（缩略图，点击图片链接看原图）
原因是你用的吸水纸性能不好,不能很快的将上面剩余的胶金吸收干净,从而造成上面的颜色较深
就只有这个原因吗 有没有其他的
抗体不合适,亲和力太猛,下面的吸收的太多了,上面就没有机会获得金颗粒了吧?我猜的，呵呵.解决方案:1 包被浓度降低.
2更换抗体
我是用夹心法检测抗原，现在出现了奇怪的问题，如果上的样品是ddh2o或者是PBS，结果应该是正常的，出现C线无T线，但是如果上的是抗原（超声打碎寄生虫的提取液），就C线T线都没有了，背景很干净，不知为何。
kmraptor wrote:
我新做的纸条是这样的 有下浅上深的现象 请问各位大虾如何解决
改变包被前的缓冲体系吧
抗体在ELISA上与标准品结合，金标后不与标准品结合不知道为什么？
我正在实验的胶体金试纸条经常出现假阳性问题，请问假阳性出现的原因有那些，改如何避免？
To:zhonhhua2000
因为你的超声提取液里含大量蛋白,起了封闭金标抗体和T、C线反应的作用
To:gaoyb0117
可能是胶体金的空间位阻效应
To:ascle
是测抗原还是抗体？能说得具体些吗？
一般假阳性主要是金标抗体没做好，或者膜未封闭
我以前金标是用气喷的方式包被的，现在不得不用浸泡的方法，请问各位如何才能浸泡均匀呢？
我在最近测定抗体的时候(双抗原夹心)也出现假阳。测了6份阴性有3份出现假阳。是什么原因呢？如果金标蛋白没有做好或者膜的封闭做的不好，我觉得应该是全部都有假阳吧？
另：有一份弱阳性怎么都测不出来。一点条带的迹象都没有。很是郁闷。这又怎么解释？
qingtianjinglin wrote:
To:zhonhhua2000
因为你的超声提取液里含大量蛋白,起了封闭金标抗体和T、C线反应的作用
To:gaoyb0117
可能是胶体金的空间位阻效应
To:ascle
是测抗原还是抗体？能说得具体些吗？
一般假阳性主要是金标抗体没做好，或者膜未封闭
我的理解是这样的，由于在探针重悬液中除了金标抗体以外，还含有大量的其他做为稳定剂的蛋白质（也就是BSA），后者的含量一般要超出一千倍以上，几乎把金探针给完全“包裹”在里面，类似于封闭的效果。我在上样水，PBS的时候就有C线，如果上样是抗原反而没有C线了。是不是这里的C线不是抗原抗体的特异性结合产生的显色，而是羊抗鼠的抗体与探针中的过量的BSA非特异相互结合（类似蛋白质相互作用的那种效果），产生的显色？
TO qingtianjinglin: 我也觉得是什么东西在干扰显色，如果说超声提取液里含大量蛋白,起了封闭金标抗体和T、C线反应的作用，人血清中的杂质更多，在临床检测的时候会更加干扰啊。
呵呵,这个问题问得有点傻.先天不足,只能尽力而为吧
抗体反复冻融对试纸条的假阳性有影响吗??
可能会有影响的，抗体反复冻融可能会使蛋白降解或者变性，抗体的效价可能会下降。有的时候也可能是腹水放的时间太长了，纯化出来的抗体质量就不太好了，经不起长时间的放置，再经过反复冻融就更不好了。我们以前用的腹水放得时间久了，做出来的东西就会有假阳，后来用了新鲜的腹水纯化出来的抗体做出来的产品就没有假阳了。
各位我想请教一个问题，在制备胶体金的时候，有的人用HALCL4. 3H2O，有的人用AuCl·3HCl·4H2O，到底哪种好些？谢谢
一般用前者多，譬如Sigma的 G-4022.
关键还是看最后制备的胶体金质量吧
To:liz135
估计你的抗原纯度还是有点问题，导致部分假阳性
弱阳性是很难测的，这跟免疫层析方法学有关
如还有问题请PM我吧
To:zhonghua2000
不好意思，申明一下，我的留言是回复这个问题而写的
“我以前金标是用气喷的方式包被的，现在不得不用浸泡的方法，请问各位如何才能浸泡均匀呢？ ”
抱歉，下不为例！
To:liz135
测了6份阴性有3份出现假阳，那肯定是抗原特异性的问题了！
如果你是双抗原夹心的话，那就是抗原标记金罗，那一定要注意标记完成后的封闭，特别是封闭用的蛋白！
虽然我现在从事的是另一个免疫技术平台，但曾经三年的胶体金情缘，让我见到这个贴就觉得非常亲切，一定要让自己留名，发表一点陋见！呵呵！
我最近做测血清中抗体的条子，与PBS反应比较强，如何消除这个非特异性呢？多谢。
lk2281 wrote:
我最近做测血清中抗体的条子，与PBS反应比较强，如何消除这个非特异性呢？多谢。
PBS浓度多高？双抗原夹心还是其他？与其他无关的血清反应吗？
标记后离心,金标出现很多沉淀,一般有哪些原因呢?
盐粒子含量高，造成金子凝聚！
