小弟现在用的方法总是染不出来。
请大家多多指教
meini wrote:
这片文献上有很漂亮的EPC集落 "Granulocyte Colony-Stimulating Factor Mobilizes Functional Endothelial Progenitor Cells in Patients With Coronary Artery Disease"(Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2005;25:296-301.)
是pdf 文件,不知道怎么上传,如果有需要请告诉我邮箱.
你好！麻烦你发一分给我，先谢了！！！
我的eMail:fanah77@sohu.com
harry158:
你好，我也打不开下面这篇综述，能否发一份到邮箱(fanah77@sohu.com) 多谢你了！
综述 <Unresolved questions, changing definitions, and novel paradigms for defining endothelial progenitor cells >
(blood ,106,1525-1531).
本版不提倡留下邮箱地址索要资源,可通过pm联系战友
如何pm
谢谢wzmc225上传的图片，老外的做得真好呀。我感觉我做的骨髓源EPC很与他的集落很相似，而我 做的人外周血和鼠外周血都没有成功，也不知道人家是怎样做出来的，看来我一定要好好分析和调整分离和培养方案了
请问园子里有谁要定购国外的抗大鼠的CD133，CD34、VEGFR（用来鉴定内皮祖细胞）。考虑到国外的抗体价格高（但是量多），我想跟其他实验室的一起定购，不知有没有志同道合者，最好是湖南地方的。请通过QQ（405516686）或者跟贴联系。前几个月买了国内的抗体做了流式和免疫荧光，发现特异性太低，没办法只好重新买抗体。希望有意者能尽快予以联系。
我也正好需要，可以考虑一块定。你在哪啊，我是重庆的，可惜离得太远了。
我是新手，跟着老师做EPC。
大鼠骨髓的做得不错。但人和大鼠外周血老做不出来。根本没有细胞。
人外周血一般做10/20ml。大鼠外周血做的是2-4ml量。
采用的是常规方法，密度1.077/1.071人细胞分离液离心分离后再用PBS洗两次。但就是没有细胞。。。
是血量不够，洗得次数太多，还是其他原因啊？
哦，对了，由于没有水平离心机，用的是普通的离心机，不带控温的/
汗一个
to:exploiter001要是你是湖南的就好了!
可以考虑就好，你的QQ号码是多少？
再问一声湖南的朋友，有没有人需要啊，赶紧联系！
请问一下，国外有哪家公司有抗大鼠的CD133卖？
to wux1:
在晶美生物工程有限公司有代理国外的大鼠CD133
ab16518 CD133 antibody 100 ug 3980
ab16518说明书.mht (252.75k)
请教一下各位，除了人CD133有文献支持是内皮祖细胞标志外，有文献支持小鼠和大鼠的CD133是内皮祖细胞的标志吗？
请看一下以下贴子
>,虽然是个人QQ，还是要屏蔽下。
我准备用percoll 法分离骨髓单核细胞，传代后将P1代细胞置于内皮细胞培养体系中诱导，用CD133检测内皮祖细胞，但是因为CD133标志是不断变化的，所以不知道选择什么时间点进行检测合适，捡出率高么？
欢迎各位前辈指点！多谢！
请问各位战友，培养内皮祖细胞加生长因子如bFGF,EGF,IGF-1以多大浓度为宜？另外，我看多位战友用tris稀释生长因子，此tris该如何配制？万望指教为谢！！
近国内有人完成内皮祖细胞培养及鉴定，鉴定方法中使用indian ink，认为 Indian Ink可作为单核/巨噬细胞特异性较强的鉴定试剂。该实验认为目前多数报道的EPC（国外有报道认为存在两种EPC,即Early EPC和late EPC，此处报道者较符合前者）并非EPC，实乃单核/巨噬细胞，其理由之一就是该细胞indian ink摄取明显增加。请问各位战友，indian ink摄取意义如何？它能强有力的鉴别单核/巨噬细胞和内皮细胞吗？谢谢！
大家好，我养内皮祖细胞已经半个月了，但是现在还没有见到内皮祖细胞长的什么样子，这是我的细胞在的三天的样子，大家帮忙分析一下原因吧，先谢谢了。
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图像有点看不清，我养了半年了，对细胞形态还是比较熟悉的，我的邮箱是fanglijian519◎163.com，有空你把照片发到我邮箱，我帮你看看
liyanfang wrote:
大家好，我养内皮祖细胞已经半个月了，但是现在还没有见到内皮祖细胞长的什么样子，这是我的细胞在的三天的样子，大家帮忙分析一下原因吧，先谢谢了。
照片质量不好，模糊，不过可以看的出来细胞数量很少，站友要学会如何用数码镜下拍照。
BTW：内皮祖细胞属于比较难养的原代细胞，半个月不成功也是很正常的现象
各位战友，本人买了CHEMICON公司的人血浆纤维连接蛋白1mg×10，效果很好。我实验将近结束，还有几支蛋白，请问那位战友需要，请与我联系，我在南京，谢谢！
starriveryt wrote:
我养的大鼠EPC，VEGF的浓度为10ng/ml，效果不错
FN我们倒没用，贴壁也还可以：）
我用的也是这个量，效果不错
exploiter001 wrote:
我也正好需要，可以考虑一块定。你在哪啊，我是重庆的，可惜离得太远了。
你已经买到了吗
pengsimson wrote:
请问有DiI-LDL和FITC-Lectin的方法吗？
小弟现在用的方法总是染不出来。
请大家多多指教
方法我有，你有DiI-LDL吗，我可以买你一点吗
rosemimi wrote:
大家好：
我现在细胞养的还可以，用lectin UEA-1.染色基本95%为阳性，但还想用DiI- AcLDL鉴定，但是DiI-associated AcLDL需要量不多，而且卖的包装都比较大而且不便宜，我们实验室有不少lectin UEA-1.希望于园子里养epc的战友交换或者买点小剂量的，希望大家帮帮忙
谢谢！
我也想买一点。我的联系电话：13306211019
Emai:mengqy@163.com
zichuanxu wrote:
我想请教大家一个问题：请多赐教！我们可以通过三色流式分析纯化自己所养的单个核细胞得到内皮祖细胞。CD31可以买到荧光标记的一抗，但是CD133和CD34只能买一抗和荧光标记的二抗。如果CD34的一抗是兔抗鼠的，CD133的一抗还可以用兔抗鼠的吗？大家知道通用型的荧光标记的二抗（抗兔）可以与CD34和CD133的一抗结合，我们就没有办法再区分细胞到底是表达CD34还是CD133了，也就无法区分细胞到底是内皮细胞还是内皮祖细胞！是不是CD34和CD133的一抗要买不同的动物来源，二抗也要随之改变呢（比如CD34的一抗是兔抗鼠，CD133的一抗就用驴抗鼠的）？
现在我很着急， 不知道怎么办，请哪位高手指点一下！！！！！
不需要，一抗什么抗鼠的 都可以，不受影响，另外请问你有CD133一抗抗大鼠的吗
