大家好
我用碱裂解法提到一个可能的未知质粒
现在想用合适的方法鉴定它是不是质粒,另外想对其全序列测序
我用EcoRI、HindIII、NotI、NdeI都不能切。
不知各位有没有什么好方法?谢谢了 !
1.跑电泳可见其是否具有典型的条带;
2.lz提供的信息是不是少了些。质粒来源于哪里?
3.测定吸光度比值;
4.你怎么知道可能是一个质粒,有什么依据?
用碱裂解法一般提到的应该是质粒,可以通过电泳和酶切来确定。电泳可以看到有质粒的特征,有两条带或者三条带,而不是在加样孔附近的一条带,感觉很大,说明可能是DNA。知道是什么质粒吗?即使不知道是什么质粒,也可以选择最为常用的一些酶切位点,用限制性内切酶来切,因为一般的质粒上都有最常用的酶切位点,如果可以切开(单酶切或者双酶切)都可以确定的。
谢谢两位
提到的样品有时候是三条带 或者两条带
其中紧随7KB条带之后有较弱的一条带
多次重复结果都是这样,有时候如果培养条件改变,则什么都提不到
上面提到的内切酶无法切啊 ,手头没有其他的酶了