各位老师好，最近想做自由方面的检测，有几个问题不清楚，想请教。将非常感激应助的各位老师，叩谢！！
1.我主要想做脊髓和皮下组织的羟自由基检测和丙二醛检测，我的步骤是
a. 在冰盘上快速脊髓,置0～4℃生理盐水中漂洗,然后放于-80度低温冰箱保存。这里的问题是放在冰箱里保存2周，羟自由基会不会丢失？？
b.将脊髓或组织1g加入9ml的0～4℃生理盐水，在冰水浴中用玻璃匀浆器制成10%的匀浆，用离心机3 000 r/min, 离心15min,取上清液分3份置- 20℃冻存,用于测定羟自由基、NO、MDA。这里的问题是，测定的时候因为样本很多，需要要96孔板测定，在我从准备到开始测的这段时间内会不会有羟自由基的丢失？准备时间最好控制在多少分钟比较合适?
除了上面的需要注意的，还有哪些注意事项呢？？
感谢帮助我的每一位老师！！！！！！
