无人应帖呢? 我自己先顶一下吧
柱压升高，保留时间缩短，在分析中药材及中成药方面是最常见的现象。排除仪器因素，但就柱子来讲，可从如下几个方面考虑：
1 如果使用保护柱，则可能是保护柱太脏，应该更换保护柱的柱芯。
2 排除保护柱，则是柱子本身太脏。
sophie333 wrote:
最近做了些中药方面的分析,发现柱压升高了,柱子使用的时间也短了,所以想来这里和大家一起讨论下,HPLC分析中药如何解决这样的问题
分析中药、生物样品等等，还是建议使用预柱哈
sophie333 wrote:
最近做了些中药方面的分析,发现柱压升高了,柱子使用的时间也短了,所以想来这里和大家一起讨论下,HPLC分析中药如何解决这样的问题
来点个人观点
1，中药配制的溶液不管其是否澄清，进液相前一定要过滤；
2，关注中药的溶液稳定性，有些中药溶液稳定性放置一段时间后可能都会有析出或浑浊现象，掌握该药品的性质也是很重要的；
3，了解中药的类型（动物药？植物药？油脂类？水溶性？等等），进入色谱柱后容易残留在色谱柱的是什么物质？不容易洗脱的是什么物质？易用什么溶剂过渡、需要用什么溶剂、洗脱时间多长才能置换完全？
比如：并不是所有C18柱用水、甲醇分别冲洗20分钟左右就能置换完全的，如果所测物质吸附能力很强的话，应该加长冲洗的时间，比如30分钟、1个小时都有可能；
4，还得考虑到所用流动相是否带有盐？pH值是否对色谱柱损害较大？这样的话，置换的时间也应相应增加，不然也容易堵塞系统管路或色谱柱，造成柱压升高、色谱柱使用寿命降低现象。
5，中药一般组成分较多，所含基团也很复杂，所以通常情况下色谱柱的使用时间也会比化药的要短，这是正常损耗。
样品的处理也是比较关键的
有些溶解性不好的样品，建议离心后再过滤膜
中药成份复杂，样品的前处理很重要。另外样品检测完后，冲洗柱子要及时彻底，可选用样品提取或是易溶解的试剂。例如醇提样品检测完毕后，可用醇水体系冲柱效果好。
中药是容易损柱，我们这做过很多种中药的老师说加预柱往往分离效果不好，我刚做的柴胡皂苷加预注后明显拖尾，已不用预柱了。
冲柱大约要用小流速 （0.5）冲3小时，具体还看你的样品了
建议使用预柱，进样前一定要微孔薄膜过滤。冲洗柱最好梯度洗。
各位老师我最近做了试验,采用高效液相色谱法检测人参皂苷RE与Rg1，但又不想采用梯度洗脱，采用2000年版药典方法测定，测对照品均不好，调节不同比例也不出峰，出峰也是峰形极差。急待解决，请求帮助
shenxiaoxian 的问题回复：
问题很可能出在硬件上了：
１，液相的比例阀有问题，出现流动相的比例不稳，续而出现该现象；可以检修解决．
２，柱子老化了，柱效降低；可以更换一下新柱子．
第一,不同成分应选用不同材料的柱子,有的柱子不适宜分析某些试样,顶要选用适合成分的柱子!!!!!1
第二,要对样品进行纯化,杂质会对柱子的寿命产生影响,还要控制流速,流速越大,对柱子损害越大.
第三,要保证高效液相色谱仪 的正常工作,机器其他不见的损害会损害柱子!!!
最后,先查下文献报道的色谱条件,不要一想到怎么做 就做,要分析下文献的条件再选用其条件处理自己的样品!!!
强烈推荐使用预柱，中药成分复杂，微量鞣质、大分子物质容易在柱头沉积，使得柱压上升很快。我的经验：柱压明显升高后，就换预柱，将脏预柱用异丙醇、水进行超声处理，效果较好。必须注意样品的预处理，尽量除杂。进样前用0.22微孔滤膜滤过处理。
中药样品提取液的进样前处理十分重要，可在过0.45或0.22微米滤膜前先高速离心一下，如果想要最大限度的去除杂质，可过两次膜，如果样品在自动进样器上放置时间较长，要注意观察样品液是否有浑浊现象，防止柱损伤！
我很少做中药,但我做一些复杂的样品都是用离心后进样,比用滤头过滤便宜多了,杂质也很少的,做气相做液相都是优先考虑离心,再考虑过滤,做方法学验证没有差别的,离心应该是合理的吧? 现在小离心机到一万多转很方便容易的.
我从动物样品中提取了一种类胡萝卜素，但总是分不纯，考虑用液相制备，但是总是柱压升高，可能原因有：目标物质极性小；目标物质甲醇溶解性不太好。问各位老师怎么办？可否更换流动相来解决。谢谢
请问各位老师:进样后为什么不出锋或是出锋很少,流动相也更换了不少.谢谢
