体内药物分析的特点

①样品复杂，干扰物质多

②样品量少，药物浓度低

③工作量大，测定数据的处理和阐明有时不太容易

生物样品前处理方法

蛋白质的去除；缀合物的水解；样品的分离、纯化与浓缩；浓缩

对检测方法的要求

检测方法要具有高灵敏度和高专属性

生物样品测定方法的基本要求

专属性

专属性是分析方法测量和区分共存组分中分析物的能力，既能证明所测的药物为原形或其代谢物，并能排除某些内源性物质和杂质的干扰

标准曲线与线性范围

1.用回归分析方法(如用加权最小二乘法)获得标准曲线。

2.标准曲线高低浓度范围为线性范围。

3.用至少6个浓度建立标准曲线。

精密度与准确度

1.要求选择3个浓度的质控样品同时进行方法的精密度和准确度考察。

2.低浓度选择在定量下限附近，高浓度接近于标准曲线的上限附近；中间选一个浓度。

3.每一浓度每批至少测定5个样品。

4.精密度用质控样品的批内和批间相对标准差(RSD)表示，相对标准差一般应小于15%，在定量下限附近相对标准差应小于20%。

5.准确度用相对回收率表示，即采用“回收试验”或“加样回收试验”得到药物在样品中的回收率，一般应在85%～115%范围内，在最低定量限附近应在80%～120%范围内

定量下限

定量下限是标准曲线上的最低浓度点，要求至少能满足测定3～5个半衰期时样品中的药物浓度，或Cmax的1／10～1／20时的药物浓度，其准确度应在真实浓度的80%～120%范围内，RSD应小于20%，信噪比应大于5

样品稳定性

根据具体情况，对含药生物样品在室温、冰冻或冻融条件下以及不同存放时间进行稳定性考察，以确定生物样品的存放条件和时间

提取回收率

分析过程的提取效率，能反映出样品预处理过程中组分丢失的情况，是评价萃取方案优劣的指标之一，以样品提取和处理过程前后分析物含量百分比表示

质控样品

质控样品系指在生物介质中加入已知量待测药物所配制的样品，用于质量控制

质量控制

在生物样品分析方法确证完成之后开始测试未知样品，每个未知样品一般测定一次，必要时可进行复测。每批生物样品测定时应建立新的标准曲线，并随行测定高、中、低3个浓度的质控样品，每个浓度多重样本。每个分析批质控样品数不得少于未知样品数的5%，且不得少于6个。质控样品测定结果的偏差一般应小于15%，最低浓度点偏差应小于20%